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飼料中維生素B2的液相色譜(HPLC)檢測(cè)方案

點(diǎn)擊次數(shù):6676   發(fā)布時(shí)間:2023/2/15 15:09:08

飼料中維生素B2的液相色譜(HPLC)檢測(cè)方案
 
維生素B2又叫做核黃素,為異咯嗪衍生物,桔黃色,易被堿、光及金屬元素破壞。核黃素是許多氧化還原酶的重要組成部分,參與能量和蛋白質(zhì)代謝。動(dòng)物缺乏核黃引起體代謝紊亂。其癥狀:輕則表現(xiàn)為生長受阻,生產(chǎn)力下降,嚴(yán)重者,豬發(fā)生皮炎,形成痂皮及膿腫,眼結(jié)膜、角膜炎;母畜缺乏則出現(xiàn)早產(chǎn),胚胎死亡及胎兒畸形;雛雞的典型癥狀為足跟關(guān)節(jié)腫脹,趾內(nèi)向彎曲成拳狀,急性缺乏癥能使腿部麻痹、癱瘓;種雞缺乏時(shí),種蛋孵化率低,雛雞成活率低。
參考國標(biāo)(GB/T 14701-2002),利用高性能的LC-2010液相色譜儀,經(jīng)實(shí)踐檢測(cè)可提供飼料中維生素B2的HPLC檢測(cè)方案,得出的結(jié)果準(zhǔn)確可靠,檢出限好,適用于配合飼料、濃縮飼料、復(fù)合預(yù)混合飼料、維生素預(yù)混合飼料中維生素B2的測(cè)定。
 
液相色譜法對(duì)飼料中維生素B2的詳細(xì)檢測(cè)方法
二,試樣溶液的制備
稱取維生素預(yù)混合飼料0.25g-0.5g,于100ml棕色容量瓶中,加入三分之二的提取液于80-100℃水浴中煮沸30min,待冷卻后加入14ml甲醇,用提取液定容至刻度,混勻,過濾。維生素預(yù)混合飼料樣液需有提取液進(jìn)一步5倍-10倍,取部分過濾液過0.45µm濾膜過濾,液相色譜儀分析。
三,色譜條件
  色譜柱: C18   150mm×4.6mm×5μm;
  流速:1.0mL/min;
  溫度:室溫;
  進(jìn)樣量:20μL;
  檢測(cè)波長:?jiǎn)螜z維生素B2為267nm,多種維生素聯(lián)檢為280nm。
  流動(dòng)相:在已裝入700ml去離子水的1000ml容量瓶中,加入50mgEDTA、1.1g庚烷磺酸鈉,待全溶解后,加入25ml冰乙酸、5ml三乙胺,用去離子水定容至刻度搖勻。用冰乙酸、三乙胺調(diào)解pH至3.4±0.02,過0.45µm濾膜,取該溶液860ml與140ml甲醇混合,超聲脫氣,待用。
 

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